植物活性多糖的提取方法有多种,在水提醇沉的基础上,常采用酶解、微波、超声波,膜处理和CO超临界萃取等方法进行辅助提取或精制.最常用的还是水提醇沉法.
1.仪器:电子天平,超声波清洗器,电热恒温水浴锅,抽滤设备,分光光度计,容量瓶,刻度吸管等
(3)蒽酮试剂:0.2 g蒽酮溶于100 mL浓 H2SO4中.当日配制使用.
1.葡萄糖标准曲线支大试管,按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液:
在每支试管中立即加入蒽酮试剂4.0mL,迅速浸于冰水浴中冷却,各管加完后一起浸于沸水浴中,管口加盖,以防蒸发.自水浴沸腾起计时,准确煮沸l0 min,取出,用冰浴冷却至室温,在620 nm波长下以第一管为空白,迅速测其余各管吸光值.以标准葡萄糖含量(g)为横坐标,以吸光值为纵坐标,绘出标准曲线.植物样品中可溶性糖的提取:将样品粉碎,105 C烘干至恒重,精确称取1~5 g,置于50mL三角瓶中,加沸水25mL,加盖,超声提取10 min,冷却后过滤(抽滤),残渣用沸蒸馏水反复洗涤并过滤(抽滤),滤液收集在50mL容量瓶中,定容至刻度,得可溶性糖的提取液.
3.稀释:吸取提取液2mL,置于另一50mL容量瓶中,以蒸馏水定容,摇匀.
4.测定:吸取1 mL已稀释的提取液于试管中,加入4.0 mL蒽酮试剂,平行三份;空白管以等量蒸馏水替代提取液.以下操作同标准曲线平均值在标准曲线上查出葡萄糖的含量(g).
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