植物DNA提取实验用于:(1)获得较纯的真核细胞基因组DNA;(2)后续PCR分析,RFLP分析,基因文库的构建,基因探测等的研究。
这是一种快速简便提取植物总DNA的方法。先将新鲜的叶片在液氮中研磨,以机械力破碎细胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液,使细胞膜破裂。同时将核酸与植物多糖等杂质分开(十六烷三甲基溴化铵,简称CTAB,是一种阳离子去污剂),再经氯仿-异戊醇抽提去除蛋白,即可得到适合于酶切的DNA。
4. 在5 ml离心管中加入抽提缓冲液2.5 mll,60℃保温1小时。
9. 加入2/3倍体积预冷异丙醇,-20℃保温30 min-1 h,缓缓混匀DNA成絮状折出。
真核细胞基因组较大,在操作中应注意动作轻柔,且在低温下进行,以最大限度地减少机械和化学作用对DNA的剪切,从而获得相对完整的DNA。博鱼网站 BOYU博鱼网站 BOYU
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